Tests Rapides
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Principe
La plupart des pathologies vétérinaires causées par Clostridium perfringens sont de type intestinales et impliquent les types B, C et D. Le Type A a été impliqué dans de rares cas de gastrites et de maladies hémolytiques des ruminants et dans des entérites hémorragiques du bétail, des chevaux et des chiens.
Clostridium perfringens type A, cause des entérites nécrotiques chez la volaille et des toxi-infections alimentaires chez l’homme. La mise en évidence de la toxine alpha dans le contenu de l’intestin grêle est la seule façon de poser un diagnostic de certitude d’entérotoxémie. Jusqu’à présent, cette mise en évidence de la toxine alpha passait par l’injection par voie intraveineuse chez la souris d’échantillons suspects en présence d’immunsérums capables de neutraliser les autres toxines. La méthode ELISA permet de détecter la toxine alpha dans des fluides biologiques (contenu intestinal, liquide péritonéal ou péricardique) ou dans des surnageants de culture en moins de 3 heures. Le test peut être utilisé en association avec le test Epsilon (BIOK 176).
Contenu du kit
10 Flacons pelle avec solution de dilution
10 Tigettes toxine alpha
1 Notice
Mode opératoire
Prélever le contenu intestinal ou les échantillons biologiques (liquide péricardique
ou péritonéal).
Si l’échantillon est liquide, en prélever une cuillère rase et la diluer dans le liquide contenu dans le flacon.
Bien homogénéiser en évitant la formation de mousse.
Si la consistance de l’échantillon est solide, éliminer l’excédent
à l’aide d’une spatule ou d’un objet propre.
Introduire dans le liquide une tigette, flèche vers le bas.
La surface rouge de la tigette ne doit être immergée.
Attendre maximum 10 minutes et interpréter le résultat.
Pour conserver la stabilité des réactifs, veiller à refermer immédiatement
le récipient contenant les tigettes.
Si on envisage d’utiliser les tigettes avec du surnageant de culture, il faut
diluer ce dernier au demi dans le liquide contenu dans les flacons pelle.
Les meilleurs résultats sont obtenus avec des cultures réalisées en milieu
TGY en condition anaérobie à 37°C (culture 4 heures en tube sans agitation).
Composition du milieu TGY
- trypticase (peptone trypsique de caséine) 30 g
- extrait de levure 20 g
- glucose 1 g
- L-cystéine 1 g
Dissoudre le trypticase et l’extrait de levure dans 950 ml d’eau et autoclaver.
Dissoudre le glucose et la L-cystéine dans 50 ml d’eau et filtrer
stérilement.
Lorsque les 950 ml de milieu sont refroidis, ajouter les 50 ml
de glucose et de cystéine.
Précautions d'utilisation
- Pour un fonctionnement correct du réactif, la portion rouge de la tigette ne doit à aucun moment se trouver sous le niveau du
liquide. Pour que cela ne se produise pas, évitez la formation de mousse lors de la dilution de l’échantillon.
- L’échantillon à analyser ne doit pas être trop concentré. Ne pas préparer un échantillon supérieur à un volume correspondant à
une cuillère rase.
- Porter des gants lors de la réalisation du test.
- Le kit doit être conservé à température ambiante dans un endroit sec. Refermer immédiatement le tube après usage car l’humidité
limite la stabilité des tigettes.